Вестерн блот дахь анхдагч эсрэгбие ямар зорилготой вэ?

2024 Зохиолч: Michael Samuels | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2023-12-16 01:48

Шууд илрүүлэх аргын тусламжтайгаар фермент эсвэл фторофорын коньюгацитай анхдагч эсрэгбие дээрх сонирхсон эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхэд ашигладаг толбо . Шууд бус илрүүлэх аргад шошго оруулаагүй болно анхдагч эсрэгбие анх эсрэгтөрөгчтэй холбоход ашигладаг.

Цаашилбал, Western blot -ийн анхдагч эсрэгбие гэж юу вэ?

The анхдагч эсрэгбие сонирхож буй уургийн эпитоп буюу өвөрмөц амин хүчлийн дарааллыг таньж, холбодог. Хоёрдогч эсрэгбие ашигласан барууны толбо ихэвчлэн ферменттэй нийлдэг; Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг фермент бол морины улаан лууван пероксидаза (HRP) ба шүлтлэг фосфатаза (AP) юм.

Нэмж дурдахад үндсэн эсрэгбие юу хийдэг вэ? Анхдагч эсрэгбие нь тодорхой эсрэгтөрөгчтэй холбогддог иммуноглобулинууд юм. уураг , пептид, жижиг молекул гэх мэт) -ийг сонирхдог бөгөөд ихэвчлэн холбогдоогүй байдаг. Сайн анхан шатны эсрэгбие нь эсрэгтөрөгчийг цэвэршүүлэх, илрүүлэх, хэмжихийн тулд өндөр хамаарал, өвөрмөц чанараар таньж, холбодог.

Иймээс барууны блотын зорилго юу вэ?

А. барууны толбо нь уургийн холимог дотроос тодорхой уургийн молекулуудыг илрүүлэх лабораторийн арга юм. Дараа нь уургийн молекулуудыг хэмжээсийн дагуу ялгаж, гель электрофорез гэж нэрлэдэг. Тусгаарлагдсаны дараа уургийг гелээс а руу шилжүүлнэ арчиж хаях мембран

Western blotting -д эсрэгбиеийг хэрхэн ашигладаг вэ?

Эсрэг биетүүд байна ашигласан дээр зорилтот уураг илрүүлэх барууны толбо (иммуноблот). The эсрэгбие флюресцент эсвэл цацраг идэвхт шошго эсвэл ферментүүдтэй нийлж, түрхсэн урвалжтай урвалд орж, өнгө ялгаруулж, гэрэл ялгаруулж, илрүүлэх боломжийг олгодог.